一.  细胞特性

细胞名称：A172细胞
，人胶质母细胞瘤细胞

生长特性：贴壁 上皮样

种      属
：人

培养难度
：★★

二． 培养条件

培养基：90%DMEM+10%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清
，货号:HN-FBS-500）

温度：37℃     气相
：95%空气,5% CO2

三． 传代方式

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲
，.然后置于无菌操作台，打开瓶口
，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代
，一般2到3天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:4
；

3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基
，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去
。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化）
，消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞
，使之完全脱落，然后收集细胞悬液
，1200rpm离心3min，弃上清
，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

四． 冻存条件

冻存条件
：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100）
，用4度保存的冷冻液重悬细胞
，直接冻存于-80°C。)

长期存储：液氮

五． 供应限制

该产品仅供研究使用。

发货方式

z6尊龙官网采取两种形式的细胞发货方式
：

  1. 复苏发货

                  a. T25瓶活细胞发货

                  b. 血清重悬发货

  2. 冻存管发货(干冰发货)
 对于采取冻存管方式发货的客户，为了保证可靠性z6尊龙官网会多发一管细胞(共2管)
，干冰覆盖保温运输
。

复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，z6尊龙官网会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。

z6尊龙官网生物论文基金奖励方法

奖励对象：

使用HAKATA系列产品(HAKATA全系列：血清、冻存液、试剂、细胞株等)培养细胞并在中文核心期刊杂志或SCI期刊杂志发表文章，且文章中材料和方法栏中标注我公司品牌名或公司名(英文
：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China，中文:HAKATA或z6尊龙官网生物)

该奖励方案长期有效，欢迎大家与z6尊龙官网分享获得成果的喜悦！

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